辛伐他汀通过小G蛋白干预肺动脉高压的实验研究及心肺运动试验在不同类型心力衰竭患者中的临床应用

【摘要】背景肺动脉高压病因尚未完全明确,病理生理学改变复杂,治疗棘手。近年研究结果表明,他汀类药物对于肺动脉高压有改善作用,但是其具体机制尚未完全明确。小G蛋白是他汀类药物重要作用靶点。本研究旨在讨论辛伐他汀是否作用于小G蛋白家族成员而改善肺动脉高压。方法动物实验采用野百合碱腹腔注射构建大鼠肺动脉高压模型,并应用辛伐他汀进行干预。通过免疫组织化学法和Westernblot测定小G蛋白家族成员蛋白表达位置及其水平变化,并确定血管内皮细胞凋亡及增殖改变,PCR测定小G蛋白家族成员的mRNA变化,从而确定辛伐他汀是否作用于小G蛋白而改善肺动脉高压。体外实验采用吡咯野百合碱刺激人肺动脉内皮细胞构建肺动脉高压模型,并应用辛伐他汀进行干预,同时应用甲羟戊酸、焦磷酸法呢酯和焦磷酸牛龙牛儿基牛龙牛儿酯进行刺激。观察细胞凋亡增生变化,并通过Westernblot测定小G蛋白家族成员蛋白水平变化,PCR测定小G蛋白家族成员的mRNA变化,从而确定辛伐他汀是否作用于小G蛋白而改善肺动脉内皮细胞功能,并确定辛伐他汀作用的具体信号途径。结果动物实验结果表明,野百合碱组大鼠肺动脉压力明显增高,血管重构明显,凋亡增殖标志物caspase-3和PCNA蛋白表达及mRNA水平均明显升高,小G蛋白家族成员RhoA/ROCK1,Rab1,Rac1的蛋白表达明显增高,而且集中表达于血管壁,上述小G蛋白家族成员的mRNA水平增高。辛伐他汀干预后,大鼠肺动脉压力明显下降,血管重构改善,caspase-3、PCNA及小G蛋白家族成员的蛋白表达及mRNA水平也明显降低。体外研究表明,吡咯野百合碱刺激后,肺动脉内皮细胞增殖明显,凋亡增殖标志物caspase-3口PCNA的蛋白表达和mRNA水平均明显升高,小G蛋白家族成员RhoA/ROCK1,Rab1,Rac1的蛋白表达和nRNA水平增高。在吡咯野百合碱+辛伐他汀组,小G蛋白家族成员蛋白表达和mRNA水平均较吡咯野百合碱组下降,但同时给予甲羟戊酸、焦磷酸法呢酯和焦磷酸牛龙牛儿基牛龙牛儿酯后,观察到RhoA蛋白及mRNA升高,ROCK1的mRNA水平升高,Rabl蛋白及mRNA升高,Rac1蛋白表达未见改变,但其mRNA升高。结论动物实验结果表明辛伐他汀可以明显改善大鼠肺动脉内皮细胞增生及凋亡,延缓肺血管重构,有效改善肺动脉高压的进展。辛伐他汀通过抑制小G蛋白家族成员RhoA/ROCK1,Rabl,Rac1的表达而发挥作用。体外研究结果表明,辛伐他汀改善人肺动脉内皮细胞的增生及凋亡,并可有效抑制小G蛋白家族成员的基因激活及蛋白表达。辛伐他汀主要通过抑制甲羟戊酸、焦磷酸法呢酯和焦磷酸牛龙牛儿基牛龙牛儿酯改善RhoA/ROCK1基因及蛋白过度表达,并抑制和Rab1蛋白合成,但辛伐他汀对于Rac1的抑制作用途径未能明确。
【作者】刘伟华；
【导师】柳志红；
【作者基本信息】北京协和医学院，内科学，2014，博士
【关键词】肺动脉高压；辛伐他汀；小G蛋白；甲羟戊酸；焦磷酸法呢酯；焦磷酸牛龙牛儿基牛龙牛儿酯；

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